目前,要想知道河流、湖泊、水库等地表水是否富营养化,可以通过检测水中磷、氮等营养物质的含量,或者观察水中藻类的繁殖情况来判断。但是我们今天要说的是通过检测水中的叶绿素a来判断水体是否富营养化。我们都知道水体富营养化的主要表现是水中藻类的增殖,而所有的藻类都含有叶绿素a,因此可以通过水中叶绿素a的含量来判断水中藻类的多寡。该方法的原理是用滤膜过滤一定量的样品以截留藻类,将藻类细胞研磨破碎,用丙酮溶液提取叶绿素,分别测定提取液在750nm、664nm、647nm和630nm波长处的吸光度离心。该公式计算水中叶绿素 a 的浓度。 从河流中采集叶绿素 a 水样检测所需的试剂和仪器 实验试剂 1、丙酮。 2、碳酸镁。 3、丙酮溶液:9+1。 将100ml 实验用水加入900ml丙酮中。 4、碳酸镁悬浮液。 称取1.0g碳酸镁,加入100ml实验用水,搅拌成悬浮液(使用前摇匀)。 5、玻璃纤维滤膜:直径47mm,孔径0.45um-0.7um。 实验设备 1、取样瓶:1L或500ml棕色带磨口玻璃瓶。 2、过滤装置:配有真空泵和玻璃砂芯过滤装置。 3、研磨装置:玻璃研钵或其他组织研磨器。 4、离心机:相对离心力可达1000×g(转速3000r/min~4000r/min)。 5、玻璃刻度离心管:15ml,旋盖材料,不与丙酮反应。 6、可见分光光度计:配10mm石英比色皿。 7、针滤器:0.45um聚四氟乙烯有机相针滤器。 8、通用实验室仪器和设备。 水样采集与保存 水样采集一般采用有机玻璃集水器或其他合适的采样器采集水面对于水深0.5m的水样,可根据需要在湖泊、水库中分层取样或混合取样,取样体积为1L或500ml。如果水样中含有沉淀物(如沉淀物等),将水样摇匀后倒入2L量筒中,避光放置30分钟,在水面以下5cm处取水样,转移至取样瓶中。每升水样加入1ml碳酸镁悬浮液,以防止酸化引起色素溶解。水样采集后应在0℃-4℃避光保存和运输,并在24小时内运至检测实验室过滤(如水样不能在24小时内送至检测实验室,则应就地过滤,滤膜避光保存(冷冻运输),水样滤膜-20℃避光保存,14天内分析完成。 准备水样 在过滤器单元上安装玻璃纤维过滤器。根据水体营养状况确定采样量。具体以过滤水样的体积为准。用量筒量取一定体积的混合水样,过滤,最后用少量蒸馏水冲洗滤壁。过滤时,负压不应超过50kPa。当水样刚完全通过滤膜时,吸滤应完成。用镊子取出滤膜,将有水样的一面对折,用滤纸擦干滤膜。
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